繼上篇關于OptoTrack動物視覺刺激系統(tǒng)的一些常見問題給出解答后，更多的研究人員提出了更多的問題，在此，我們一一作答，共同探討。

Q1：在OptoTrack視覺刺激實驗中，每組里面的實驗動物（老鼠）典型數量是多少？

A1：通常，在研究論文中，每組6只小鼠是公認的數目。在藥理學研究（藥wu開發(fā)）中，組的大小通常較大，大約有十二只動物。

Q2：是否可以通過在給定的時間范圍內計算“視動反應”來量化視覺能力？

A2：這不是OptoTrack如何量化視動反應的行為，但它卻可能是一個可靠的選擇。然而，需要注意的一點是，潛在的時間間隔（例如2分鐘的觀察）應該在個體小鼠之間具有可比性。視運動反射是一種相對“弱”的反射，因為它可以被許多其他行為所覆蓋，例如探索、清潔和梳理。當動物在做其他事情的時候，把沒有視運動事件作為“視力bu良”的指標是沒有意義的。實際上，你應該只在你的統(tǒng)計中計算動物可能表現(xiàn)出視運動行為的次數。換句話說，你應該考慮到動物的整體行為，只看那些動物不做其他事情的時間，然后計算在這段時間內動物跟隨旋轉刺激的事件數。也許你甚至會考慮到動物對刺激的跟隨程度。所有這些考慮都應該改善對動物視運動行為的評估。但如果你做了所有這些，那么你就非常接近OptoTrack如何分析動物的視覺運動行為。

Q3：可以用OptoTrack測量色覺嗎？

A3：OptoTrack可以測量視敏度和對比敏感度。測量色覺是一個非常困難的問題。原則上，可以借助光動力反射來測量顏色視覺（即，將兩種不同顏色qu分為不同的能力）。為此，將呈現(xiàn)不同顏色（例如：藍色/紅色）的條形，而不是不同亮度（例如：黑色/白色）的條形。如果兩種顏色被感知為不同（即條紋邊界處存在顏色對比），則將觸發(fā)光動力反射。盡管這在理論上很簡單，但在實踐中卻非常困難。為了正確測試兩種顏色被感知為不同，必須確保不同顏色的條看起來沒有不同的亮度。否則，除了顏色對比外，還會有亮度對比。實際上，校準等亮度的顏色非常困難，特別是如果一個人只能調整三種基本顏色，即計算機顯示器的“ R”，“ G”和“ B”。適當的等亮度顏色校準取決于所研究物種中感光體的特定光譜靈敏度，光學儀器（角膜，晶狀體，玻璃體，視網膜組織）的光譜濾光片特性以及光譜上不同的感光體的數量。此出版物中描述了其他注意事項：光學儀器（角膜，晶狀體，玻璃體，視網膜組織）的光譜濾光片特性以及光譜上不同的感光體的數量。此出版物中描述了其他注意事項：光學儀器（角膜，晶狀體，玻璃體，視網膜組織）的光譜濾光片特性以及光譜上不同的感光體的數量。

Q4：是否可以通過視運動測量來評估所有小鼠系？

A4：原則上是。但是，也有一些例外。

例如，小鼠系DBA2 / J是研究青光眼的模型。然而，一些研究發(fā)現(xiàn)，這些小鼠完全沒有視神經反射，而與它們的視網膜表型無關（Barabas et al 2011）。這個發(fā)現(xiàn)在不同的實驗室之間是不一致的，其他實驗室發(fā)現(xiàn)光動力反射能很好地反映視網膜的表型（Rangarajan等，2011；Burroughs等，2011）。DBA / 2J小鼠可能有不同的亞型，具有和不具有光動力反射能力。這凸顯了在每項研究中進行良好控制的重要性，表明您的表型觀察（例如缺乏視神經反射）確實與您的研究目標有關。

另一個例子是白化病小鼠。在這里，研究之間的數據不一致。一些研究發(fā)現(xiàn)他們沒有視神經反射。其他研究發(fā)現(xiàn)它們確實具有反射能力，但是卻是相反的：它們以錯誤的方向反射性地移動頭部，與移動的條紋圖案相反。這是由于視神經交叉處的軸突交叉錯誤。同樣，這表明了進行適當控制的重要性。

在OptoTrack中，您可以測量所有小鼠的光動力反射。如以上示例所示，但是，特定小鼠品系中沒有視動反射可能反映了生物學缺陷，可能與您的主要研究問題無關。

Q5：是否在敏銳度和對比敏感度中評估了不同類型的細胞？

A5：在解釋光動力反射時必須小心。作為行為輸出，它可能會受到沿反射路徑的任何變化的影響。視神經反射的缺乏可能是由于視網膜，視神經，累及的中腦區(qū)域或肌肉缺損所致。因此，對光動力結果的解釋通常建立在關于ji病本體論的現(xiàn)有知識（感光器死亡，視神經損傷等）上。理想情況下，視功能下降與ji病進展直接相關；在這種情況下，體內和非侵入性光動力測量可以完全替代侵入性（并可能Zui終）其他測量，例如組織學切片。

Q6：如何解釋對比度敏感度曲線（對比度敏感度是空間頻率的函數）？

A6：視覺系統(tǒng)和所有感官系統(tǒng)一樣大多對輸入（光線）的變化敏感，而對恒定的絕dui值則不太敏感。這種變化的幅度稱為對比度。系統(tǒng)的靈敏度是仍然可以感知到的Zui小對比度。這種對比度（=光強度的變化）可以是隨時間變化的對比度（臺階或閃光燈）或跨空間的對比度（亮度邊界）。當仍然可以感知到較小的對比度時，我們可以說該系統(tǒng)更加敏感。

感覺系統(tǒng)的靈敏度可以用“對比度”來描述，但從根本上說，它還取決于另一個屬性，即刺激的頻率。所有的傳感系統(tǒng)都具有頻率響應調整功能-無法感知太低或太高的頻率，并且在靈敏度范圍的中心存在一些Zui佳值。類似于對比度，頻率也可以是時間屬性（“閃爍”）或空間屬性（精細或粗糙的“模式”）。

在光運動反射測量中，我們觀察到動物對運動條紋圖案的反應。這種模式具有一定的空間頻率（由動物周圍的黑白條的數量確定），并且，由該空間頻率和旋轉速度的組合給出，我們還可以為刺激分配時間頻率。假設光刺激反射是由這種刺激觸發(fā)的，即該刺激在光刺激反射的靈敏度范圍內。然后，我們可以保持頻率恒定，并通過降低對比度來確定動物（對于該頻率！）的對比度靈敏度。當我們針對不同頻率的刺激重復相同的過程時，我們很可能會獲得不同的Zui小對比度值，而該Zui小對比度仍然可以觸發(fā)光動力反射。

或者，當我們從觸發(fā)光動力反射的刺激開始時，我們可以保持對比度恒定并更改刺激的頻率。如果我們充分改變頻率（例如，使條紋圖案的條變得更細），我們Zui終將離開給定的對比度足以引起光反射的范圍。為了再次觸發(fā)反射，我們必須增加對比度。但是，如果對比度已經達到Zui大會怎樣？仍以zui大對比度觸發(fā)光動力反射的zui細條紋圖案（zui高空間頻率）被稱為“視敏度”。

請注意，對視動反射的測量不能測量動物的整體“視覺能力”。動物可能仍然“看到”沒有引起視運動反射的細條紋圖案。視光測量僅提供THIS系統(tǒng)（視光反射系統(tǒng)）的對比敏感度功能。

在大多數研究應用中，對比度敏感度函數的絕dui值（尤其是視敏度）并不那么重要。取而代之的是，通常會比較兩種情況（健康與ji病，zhi療與未zhi療，年輕與老年人等）。這樣，測量值也是“自校準”的。例如，取決于顯示刺激的硬件（例如，舊顯示器，新顯示器，被光源照亮的紙板鼓），Zui大可實現(xiàn)的刺激對比度將有所不同。當硬件顯示器可以實現(xiàn)更高的對比度值時，報告的視敏度也將更高。測量的比較性質（“經過處理比未經處理更好”）解決了這個問題。

Q7：青光眼：能否測試青光眼小鼠模型的視神經反射？

A7：小鼠系DBA2 / J是研究青光眼的模型。然而，一些研究發(fā)現(xiàn)，這些小鼠完全沒有視神經反射，而與它們的視網膜表型無關（Barabas et al 2011）。這個發(fā)現(xiàn)在不同的實驗室之間是不一致的，其他的發(fā)現(xiàn)光動力反射能很好地反映視網膜的表型（Rangarajan等，2011；Burroughs等，2011）。）。DBA / 2J小鼠可能有不同的亞型，具有和不具有光動力反射能力。這凸顯了在每項研究中進行良好控制的重要性，表明您的表型觀察（例如缺乏視神經反射）確實與您的研究目標有關。除DBA2 / J型青光眼小鼠外，還有青光眼的手術模型-雙邊頸總動脈閉塞（BCCAO）。

Q8：NaIO 3：碘化鈉模型是干燥AMD的模型嗎？

A8：否，但是它模仿了ji病的某些特征，包括RPE細胞退化后的感光細胞凋亡以及功能和形態(tài)變化。

Q9：NaIO 3：全身注射高劑量的NaIO 3（碘化鈉）后，大多數感光細胞死亡，但有時人們可以看到OMR視力僅下降一半。為什么？

A9：需要針對每種ji病模型分別建立在細胞和組織水平上的物理和功能損傷與對光動力反射的相應影響之間的確切關系。對于NaIO 3，主要靶標是具有繼發(fā)性感光細胞死亡的視網膜色素上皮。這個過程不僅具有時間成分（我什么時候希望看到效果？），還具有空間成分。對于NaIO 3的全身性注射，損傷是放射狀的，從中央視網膜開始，并迅速吞噬周圍的視網膜。

光動力反射的生物學特性使得當周圍有足夠的功能性視網膜保留時，光動力反射被非常牢固地保留。視網膜的形態(tài)可在中央和周圍中部顯示出嚴重損害，以致完全不再有視力的程度。然而，在遠處的外圍，當刺激足夠容易時（此處：比正常視敏度容易50％），可以保留足夠的功能一段時間以觸發(fā)視神經反射。這種現(xiàn)象類似于局部視網膜激光損傷模型的觀察結果，在該模型中，人們需要對視網膜造成一定程度的損傷，然后才能看到對光動力反射的重大影響。

Q10: 抗癲癇藥Vigabratin具有眼毒性，表現(xiàn)為視野變窄?？梢允褂肙MR進行測量嗎？

A10：光動力反射（OMR）非常堅固。出于研究目的，這既可以是優(yōu)點，也可以是缺點。在這種情況下，這可能是不利的。視網膜的其余部分基本上不受影響的區(qū)域性損傷通常對光動力行為的影響很小。原因是視網膜的健康部分足以正常驅動視神經反射。

話雖如此，可能值得檢查每個特定應用程序中的情況。也許您的藥wu對您所知道的部分視網膜具有毀滅性影響，但除此之外，對其余的視網膜也有輕微的影響。也許這兩種效應的結合可能會破壞視光反應，從而足以提供有意義且有見地的行為讀數。這種體內行為讀數（如果存在）可能會帶來巨大的研究收益，因為它可以輕松地縱向監(jiān)測ji病的進展，甚至在需要時也可以每天監(jiān)測。

上海欣軟提供了OptoTrack軟件的遠程演示，可以在您的特定研究模型中對其進行評估。這將揭示光馬達的測量值是否是一個很好的讀數。

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OptoTrack通過先天反射行為測量嚙齒動物的視力

所有動物的反射都有助于穩(wěn)定其眼睛中移動環(huán)境的圖像。例如，如果一個人看著行駛中的火車的窗戶，那么她的眼睛會自動跟隨風景。這些補償性眼球運動是由所謂的視動反射引起的。許多動物還具有光動力反射，可觸發(fā)補償性頭部運動。
僅當動物可以看到移動的刺激時，才會觸發(fā)這些眼睛和頭部的補償性運動。因此，觀察這些先天反射可以用作動物視覺性能需求的定量讀數。在小鼠和大鼠中，觀察光動力反射特別方便：不需要固定或手術，因為可以從肉眼觀察到相應的行為。

OptoTrack通過增加條紋圖案的難度，Zui終達到了動物視力的閾值，并且不再觸發(fā)反射。這樣可以確定動物的視敏度（通過使條紋更細）或對比度敏感度（通過減小條紋的對比度）。

此過程在OptoTrack中是完全自動化的。OptoTrack的軟件可以輕松指導您進行測量。您可以完全控制測試協(xié)議，也可以讓OptoTrack完全自動確定動物的視覺閾值。

對于廣泛的臨床前研究應用，OptoTrack是一種方便，自動化，快速且客觀的體內工具，用于篩查視覺功能障礙和ji病進展。

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